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第一篇 神经干细胞基础3

第一章　概述3

一、神经干细胞基础研究进展4

二、神经干细胞基础研究展望8

第二章　神经干细胞特性11

第一节　神经干细胞的生物学特性11

一、神经干细胞的基本特性11

二、两种分裂方式13

三、神经干细胞的标志13

四、对损伤和疾病的反应能力14

五、迁移功能和良好的组织融合性14

六、低免疫原性15

第二节　神经干细胞的识别与鉴定15

一、神经干细胞的识别15

二、神经干细胞的鉴定15

第三章　神经干细胞来源和定位18

第一节　神经干细胞的来源18

一、胚胎组织来源18

二、成体组织来源19

三、神经嵴细胞19

四、其他来源20

第二节　神经干细胞的定位21

一、侧脑室周围组织中的神经干细胞21

二、海马组织中的神经干细胞23

三、其他脑组织中的神经干细胞23

第四章　神经干细胞的发育及分化25

第一节　神经干细胞增殖与迁移25

一、神经发生过程中的神经干细胞25

二、神经干细胞的增殖25

三、神经干细胞的迁移26

第二节　神经干细胞分化及分化特性28

一、神经干细胞的可塑性28

二、神经干细胞的定向分化28

三、神经干细胞的横向分化29

四、神经干细胞的逆分化30

五、体外培养体系中神经干细胞的分化30

六、在体神经干细胞的分化31

第三节　神经干细胞分化影响因素33

一、影响神经干细胞分化的内在因素33

二、影响神经干细胞分化的外在因素33

三、神经干细胞分化研究中存在的问题40

第五章　神经干细胞的信号转导42

第一节　基本概念42

一、细胞信号分子42

二、信号转导系统的基本组成43

第二节　膜表面受体介导的信号转导46

一、离子通道型受体46

二、G蛋白偶联型受体46

三、Ras-Raf-MAPK信号途径49

四、转化生长因子β（TGF-β）通路52

五、细胞因子受体超家族54

六、可控性蛋白降解与信号转导56

七、bHLH基因65

八、同源盒基因66

第六章　神经干细胞培养69

第一节　神经干细胞培养的实验室条件与培养用液69

一、实验室设置及主要设备69

二、培养器皿72

三、培养用品的清洗与消毒灭菌73

四、培养用液78

五、特殊添加剂82

第二节　神经干细胞培养方法及建系83

一、原代培养及传代83

二、神经干细胞纯化与建系85

第三节　培养神经干细胞的观察与鉴定88

一、培养神经干细胞的观察88

二、培养神经干细胞的鉴定92

第四节　培养神经干细胞的冻存、运输与复苏92

一、冻存92

二、运输94

三、复苏94

第五节 特殊类型神经干细胞的培养95

一、大鼠神经嵴细胞培养95

二、大鼠大脑皮质神经干细胞培养96

三、大鼠海马神经干细胞培养96

四、大鼠纹状体神经干细胞培养97

五、大鼠脊髓神经干细胞培养98

六、大鼠中脑神经干细胞培养98

七、大鼠视网膜神经干细胞培养99

八、人胚大脑皮质神经干细胞培养99

九、人胚海马神经干细胞培养100

十、人胚室管膜神经干细胞培养100

十一、成人嗅球神经干细胞培养101

十二、神经干细胞培养的应用101

第二篇 神经干细胞应用107

第七章　概述107

一、神经干细胞的特性与应用107

二、神经干细胞应用基础研究进展109

三、神经干细胞应用基础研究中的问题与展望112

第八章　神经干细胞移植117

第一节　用于神经系统疾病治疗的细胞来源117

一、肾上腺髓质移植物117

二、自体颈上交感神经节移植物117

三、胎儿黑质移植物118

四、胚胎小脑移植物118

五、胚胎垂体移植物118

六、胚胎大脑组织移植物119

七、神经干细胞119

八、骨髓基质细胞源性神经干细胞121

九、胚胎干细胞121

十、基因修饰细胞122

第二节　成功移植神经干细胞的影响因素123

一、供体年龄和受体年龄123

二、细胞活力和数量124

三、移植部位124

四、移植方法125

五、移植部位血供126

六、病灶微环境126

七、损伤127

八、免疫因素127

九、体外预分化128

第九章　骨髓、脐血及其他来源的神经前体细胞130

第一节　骨髓和脐血中神经前体细胞的分离培养130

一、骨髓中神经前体细胞的分离培养131

二、脐血中神经前体细胞的分离培养133

第二节　骨髓和脐血中神经前体细胞的分化134

一、横向分化134

二、骨髓神经前体细胞分化135

三、人脐血神经前体细胞分化141

第三节　骨髓和脐血中神经前体细胞治疗神经系统疾病的实验研究142

一、骨髓神经前体细胞在神经系统疾病动物模型中的应用142

二、人脐血神经前体细胞在神经系统疾病动物模型中的应用145

三、血管途径细胞移植146

四、基因治疗149

第四节　其他来源的神经前体细胞149

一、脂肪干细胞149

二、胎盘来源的干细胞151

三、羊膜上皮来源的干细胞151

第十章　神经干细胞在体内的转归和整合153

第一节　神经干细胞在体内整合的基础153

一、脑内存在促进神经干细胞存活、分化的微环境153

二、神经干细胞的低免疫原性153

三、可以分化为成熟的神经细胞154

第二节　神经干细胞在体内转归和整合的过程155

一、神经干细胞在未成熟中枢神经系统中的转归和整合155

二、神经干细胞在成熟中枢神经系统中的转归和整合155

三、神经干细胞在体内分化为成熟的神经元156

四、神经干细胞在病变动物脑中的转归和整合157

五、神经干细胞在神经系统肿瘤组织中的转归和整合157

第三节　影响神经干细胞在体内转归和整合的因素158

一、神经干细胞的来源不同158

二、移植物的存活159

三、细胞的微环境159

四、血管再生对神经干细胞的影响160

第十一章　神经干细胞的临床应用163

第一节 神经干细胞在阿尔茨海默病治疗中的应用164

一、概述164

二、阿尔茨海默病神经干细胞移植治疗的可行性和途径165

第二节　神经干细胞在帕金森病治疗中的应用167

一、概述167

二、帕金森病神经干细胞移植治疗的可行性169

三、问题与展望173

第三节　神经干细胞在癫癎治疗中的应用174

一、概述174

二、癫癎治疗中的神经干细胞移植175

三、以神经干细胞为载体的基因治疗178

第四节 神经干细胞在脑血管病治疗中的应用181

一、概述181

二、神经干细胞治疗脑血管病的可行性182

三、神经干细胞治疗脑血管病的方法与途径183

第五节　神经干细胞在脊髓损伤治疗中的应用187

一、概述187

二、脊髓损伤细胞移植治疗现状188

三、神经干细胞移植在脊髓损伤治疗中的应用190

四、存在问题191

第六节　神经干细胞在脑外伤治疗中的应用192

一、概述192

二、神经干细胞移植治疗脑外伤的可行性193

三、神经干细胞移植治疗脑外伤现状194

第三篇　神经干细胞研究工作中相关的实验方法207

第十二章　神经干细胞研究中相关的实验技术207

第一节　电镜技术207

一、电镜简介207

二、电镜的结构与功能207

三、电镜标本制作技术208

四、神经干细胞的超微结构213

第二节　免疫细胞化学法213

一、免疫荧光法213

二、酶标记抗体法215

三、非标记抗体过氧化物酶-抗过氧化物酶法（PAP法）217

四、抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合体法（ABC法）220

第三节　培养细胞的转染技术223

一、磷酸钙介导法224

二、脂质介导法227

三、电穿孔转染法229

四、显微注射法230

五、病毒转染法231

第四节　膜片钳技术234

一、膜片钳技术的原理234

二、膜片钳法的各种模式234

三、膜片钳技术的基本操作步骤236

第五节　激光共聚焦显微镜技术240

一、激光共聚焦显微镜的工作原理、基本结构及功能240

二、激光共聚焦显微镜在生物医学及神经干细胞研究中的应用243

第六节　流式细胞仪技术244

一、流式细胞仪的结构和工作原理244

二、流式细胞仪的调试和使用245

三、样品制备246

四、流式细胞仪在神经干细胞研究中的应用247

第七节 RNA干扰技术248

一、RNAi的技术特点249

二、RNAi的分子机制250

三、RNAi试验基本过程251

四、RNAi的应用前景253

第十三章　神经干细胞研究中常用的动物模型258

第一节　脑缺血动物模型258

一、大鼠全脑缺血模型的建立258

二、大鼠局灶性脑缺血模型的建立258

第二节　癫癎动物模型260

一、点燃模型260

二、海人酸模型261

三、匹罗卡品模型262

四、遗传性癫癎动物模型262

五、其他的癫癎动物模型262

第三节　Alzheimer病动物模型263

一、毁损模型263

二、转基因动物模型264

三、衰老动物模型265

四、自身免疫性痴呆模型265

五、铝诱导痴呆模型266

第四节　帕金森病动物模型266

一、6-羟基多巴胺（6-OHDA）模型266

二、MPTP模型267

附录　信号转导中常用缩略词和英文全称270