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第一章 绪论1

第一节 基因工程的概念1

第二节 基因工程的诞生和发展1

第三节 基因工程的研究内容3

第四节 基因工程的应用5

第五节 基因工程的发展前景8

第六节 植物基因工程进展和存在的问题9

第二章 基因工程的工具酶12

第一节 概述12

第二节 限制性内切核酸酶13

第三节 DNA连接酶21

第四节 DNA聚合酶25

第五节 DNA甲基化酶27

第六节 DNA及RNA的修饰酶29

第七节 核酸酶30

第三章 克隆载体33

第一节 质粒的概念和基本特性33

第二节 常用的质粒载体36

第三节 质粒DNA的提取41

第四节 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化43

第四章 目的基因的分离45

第一节 基因克隆的意义和策略45

第二节 已知序列为基础的克隆方法46

第三节 cDNA文库构建和筛库法获得目的基因48

第四节 RACE方法获取基因的全长序列54

第五节 图位克隆和转座子标签法克隆基因56

第六节 以表达差异为基础的基因克隆方法59

第五章 植物基因工程的目的基因66

第一节 抗虫基因66

第二节 抗病基因79

第三节 抗非生物胁迫的基因93

第四节 雄性不育基因107

第五节 改良作物品质的基因108

第六节 改良植物其他性状的基因116

第六章 植物基因工程表达载体125

第一节 植物基因工程载体的种类125

第二节 致瘤农杆菌Ti和发根农杆菌Ri质粒126

第三节 植物转化载体构建132

第四节 抑制、沉默目标基因的表达载体137

第五节 无标记植物表达载体143

第七章 目的基因的转化147

第一节 植物基因转化受体147

第二节 农杆菌介导的植物转基因方法148

第三节 直接转化方法152

第四节 种质系统转化法155

第五节 病毒载体转化156

第八章 转基因植物的检测与鉴定160

第一节 PCR检测160

第二节 报告基因的表达检测163

第三节 Southern杂交鉴定170

第四节 Northern杂交鉴定179

第五节 外源基因表达蛋白的检测182

第六节 分子标记及生物芯片技术检测188

第九章 转基因植物的遗传稳定性及表达调控190

第一节 外源基因在植物基因组上的整合特点190

第二节 外源基因整合的遗传学效应和转基因沉默198

第三节 转基因植物中外源基因的遗传稳定性206

第四节 外源基因在植物基因组中的表达特点213

第五节 转化外源基因的表达调控222

第十章 转基因植物的安全性评价233

第一节 生物安全性评价概述233

第二节 转基因植物食品的安全性评价238

第三节 转基因植物生态环境的安全性评价243

第四节 转基因植物的安全性评价管理办法246

附录一 基因工程安全管理办法251

附录二 农业转基因生物安全评价管理办法256

附录三 农业转基因生物进口安全管理办法272

附录四 农业转基因生物标识管理办法275

参考文献277